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    熒光定量PCR的優(yōu)點(diǎn)和檢測(cè)方法盤(pán)點(diǎn)
    來(lái)源:測(cè)試GO 時(shí)間:2022-11-03 11:37:47 瀏覽:3086次

     熒光定量PCR檢測(cè)以下優(yōu)點(diǎn)

    1.高靈敏性:可檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞基因;

    2.高特異性和精確性:將DNA雜交的高特異性和光譜技術(shù)的高精準(zhǔn)性融合,應(yīng)用熒光探針和光電傳導(dǎo),直接探測(cè)基因擴(kuò)增過(guò)程中熒光信號(hào)的變化,以獲得定量結(jié)果,相當(dāng)于在PCR反應(yīng)過(guò)程中自動(dòng)完成了Northern雜交;

    3.操作簡(jiǎn)便、速度快:通過(guò)計(jì)算機(jī)和分析軟件實(shí)現(xiàn)PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)和定量分析一體化;

    4.安全、無(wú)污染:FQ-PCR在全封閉狀態(tài)下進(jìn)行PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物分析,杜絕了傳統(tǒng)PCR開(kāi)放檢測(cè)對(duì)環(huán)境的污染和由此導(dǎo)致的假陽(yáng)性;

    5.結(jié)果觀測(cè)重復(fù)性好:一起在線實(shí)時(shí)觀測(cè),結(jié)果判斷直觀,避免人為因素干擾。

     內(nèi)參基因ACTIN(溶解曲線)

    熒光定量PCR檢測(cè)的兩種方法

    1.SYBR GreenⅠ法

    PCR反應(yīng)體系中,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺?/span>DNA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。

    2.TaqMan探針?lè)ǎ?/span>

    探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。


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    文字是人類用符號(hào)記錄表達(dá)信息以傳之久遠(yuǎn)的方式和工具。現(xiàn)代文字大多是記錄語(yǔ)言的工具。人類往往先有口頭的語(yǔ)言后產(chǎn)生書(shū)面文字,很多小語(yǔ)種,有語(yǔ)言但沒(méi)有文字。文字的不同體現(xiàn)了國(guó)家和民族的書(shū)面表達(dá)的方式和思維不同。文字使人類進(jìn)入有歷史記錄的文明社會(huì)。
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