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    不同生物樣品在進行TEM測試前應該如何取材送樣？
    來源：測試GO 時間：2022-11-08 09:58:12 瀏覽：2691次

    生物樣本透射電鏡（TEM）適用于生物樣品（細胞，生物組織）材料內部形貌的分析和研究。在進行實驗之前，取材和送樣是至關重要的，如果處理不當則會直接影響實驗結果。本文向大家介紹，在我們進行生物樣本透射電鏡測試前動物普通組織以及培養細胞的取材、送樣。

     生物樣本透射電鏡測試案例圖


    動物普通組織取材、送樣：

    取材原則：切薄并盡快投入固定液；注意下述要求。

    1. 請盡快固定。動物組織最好在離體后1 min內開始固定。

    2. 非灌注的組織，厚度不超過4 mm，請用恰當方式（比如切寬薄片）體現位置和層次關系。盡量不要事先切成很小的顆粒。

    3. 請用鋒利薄刀片切組織，朝一個方向劃，不要來回切割，不要擠壓、拉扯。

    4. 含有食物殘渣（如消化道）、大量血液（如心肌）或其它黏附物（如乳腺等）的組織，請用生理鹽水快速漂洗，再投入固定液。

    5. 請保證固定液量充足。固定液和組織的體積比不小于20 : 1。

    6. 最初的30 min以后，最好在4 ℃的固定液中浸泡，嚴禁結冰（太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使組織結冰。冬季寧可常溫送樣）。

    備注：

    （1）組織尺寸和容器關系（只裝一個的參考標準）：

    芝麻到綠豆大小（如小鼠腎上腺）：請用1.5 ml EP管；

    黃豆大小（小鼠腎臟）：請用5 ml離心管；

    鋪展面積類似蠶豆大小的組織片：請用平底的25 ml廣口瓶；

    （2）每個容器含有N個組織時：容器體積要適當增大，組織不要相互擠壓變形。

     

    培養細胞常規簡易取材、送樣：

    1. 最好刮取細胞，收集在離心管中，1500 rpm離心5 ~ 10 min（該參數可按自己的經驗調整，目的是不損傷細胞結構的情況下去掉培養液成分）。

    2. 棄上清，加入固定液重懸細胞。

    3. 細胞懸液盡快（1分鐘內，久了離心難以緊固）轉移至1.5 ml尖底EP管，立即以10000 r/min離心12 min（該參數適用于一般小型臺式離心機，不可隨意更改，務必使細胞離緊不散）；離緊后的細胞約半顆綠豆大小，切不可太大。

    4. 靜置15 min，然后小心棄上清，再沿管壁緩慢加入室溫或4 ℃固定液（不可沖擊、吹散細胞）。

    5. 在4 ℃保存或運輸。嚴禁結冰（太靠近冰箱后壁或冰袋運輸都可能使組織結冰。冬季寧可常溫送樣）。

    備注：

    （1）對細胞表面結構沒有特殊觀察要求的動物細胞，均可按本法操作，比如精子、血液、脫落細胞等。薄壁細菌也可按本法處理。

    （2）觀察細胞連接的實驗，嚴禁用消化的方法收集細胞。

    （3）不耐受高速離心的樣品，請以懸液送樣。盡可能裝滿，以減少運輸途中的震蕩。

    （4）厚壁真菌等離心緊固后不易滲透的樣品，也請以懸液送樣，要求同上。

     

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    全部 3小時前 四川
    文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具。現代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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