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免疫染色技術的主要分類和原理

來源：時間：2022-12-27 10:36:28 瀏覽：3490次

廣義的免疫染色包括免疫組織化學(Immunocytochemistry, IHC) 、免疫細胞化學(Immunocytochemistry, ICC) 、免疫熒光 (Immunofluorescence, IF)，流式細胞儀分析(Flow cytometry)，免疫印跡(immunoblot, IB)即Western印跡(Western blot, WB)，酶聯(lián)免疫反應(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)和免疫電鏡(Immuno-electron microscopy, IEM)等。免疫染色(immunostaining)，包括任何基于抗原與抗體特異性結合的免疫學基本原理，檢測蛋白等目的分子的技術方法。狹義的免疫染色其檢測樣品僅限于保持原有形態(tài)的細胞或組織，通常包括免疫組化、免疫細胞化學、免疫熒光、流式細胞儀分析和免疫電鏡，而不包括免疫印跡和酶聯(lián)免疫反應。

染色原理：
用酶標記的特異性抗體/抗原直接與樣本中相應的抗原/抗體反應結合，再與酶的底物作用產(chǎn)生有色產(chǎn)物，沉積在抗原-抗體反應部位，即可對抗原或抗體進行定性、定位及定量研究。

免疫組織化學(Immunocytochemistry, IHC) ，即免疫組化，是應用抗原與抗體特異性結合的免疫學基本原理，最終通過化學反應顯色來檢測組織細胞內(nèi)抗原，對其進行定位、定性及相對定量的研究方法。狹義的免疫組化，其檢測的樣品僅限于組織切片或者培養(yǎng)的組織，而廣義的免疫組化其檢測的樣品也可以是培養(yǎng)的細胞。

免疫細胞化學(Immunocytochemistry, ICC)，狹義的免疫細胞化學，檢測對象是培養(yǎng)的細胞；而廣義的免疫細胞化學，其檢測對象可以是培養(yǎng)的細胞，也可以是組織切片或者培養(yǎng)的細胞和組織。

免疫熒光(Immunofluorescence，IF)是一項建立在免疫學和熒光檢測技術基礎上的實驗技術，依據(jù)抗原、抗體的反應原理進行組織或細胞內(nèi)抗原物質的定位和半定量，是近代免疫學的一種重要研究手段。流式細胞儀分析(Flow cytometry)技術，也是一種免疫熒光檢測技術。

免疫組化和免疫熒光所含步驟大致相同，主要包括：樣本制備、抗原修復、背景封閉、抗體孵育、蛋白檢測等

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