国产主播欧美精品,在线视频cao,中文字幕免费一区二区,日韩三级影视

預存

登錄注冊

Document

當前位置：文庫百科 ? 文章詳情

細胞增殖及毒性檢測的常見實驗方法

來源：時間：2024-09-30 10:05:50 瀏覽：3067次

細胞增殖及毒性檢測的常見實驗方法

細胞增殖及毒性檢測是生物醫(yī)學研究中的重要內(nèi)容，對于藥物篩選、毒理學研究等領(lǐng)域具有重要意義。

以下介紹幾種常見的細胞增殖及毒性檢測實驗方法：

一、MTT實驗（噻唑藍比色法）

1. 原理：MTT實驗是一種檢測細胞增殖的方法；MTT（3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽）可被活細胞內(nèi)的線粒體酶還原成紫色結(jié)晶物甲簪，而死細胞無此功能；通過溶解結(jié)晶物，可測定吸光度，從而反映細胞增殖情況。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入MTT溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)4-6小時，棄去上清，加入DMSO溶解結(jié)晶；（4）酶標儀測定570nm處的吸光度值。

二、CCK-8實驗（細胞計數(shù)試劑盒-8）

1. 原理：CCK-8實驗與MTT實驗類似，但其使用的試劑為WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯偶氮)-5-(2,4-二硫唑基)）鹽；WST-8在細胞內(nèi)的脫氫酶作用下產(chǎn)生黃色的甲簪，吸光度值與活細胞數(shù)量成正比。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入CCK-8溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)1-4小時，酶標儀測定450nm處的吸光度值。

三、Brdu實驗（5-溴脫氧尿嘧啶核苷酸實驗）

1. 原理：Brdu是一種類似胸腺嘧啶的核苷酸，可摻入DNA合成過程中；通過檢測Brdu的摻入量，可以反映細胞增殖情況。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入Brdu溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，固定細胞，加入抗Brdu抗體；（4）酶標儀測定450nm處的吸光度值。

四、克隆形成實驗

1. 原理：克隆形成實驗是通過統(tǒng)計克隆形成率來評價細胞增殖能力；克隆形成率越高，細胞增殖能力越強。

2. 方法：（1）將細胞接種于培養(yǎng)皿，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，棄去上清，固定細胞，染色；（3）顯微鏡下計數(shù)克隆數(shù)，計算克隆形成率。

五、EdU實驗（5-乙炔基-2'-脫氧尿嘧啶核苷酸實驗）

1. 原理：EdU是一種新型的DNA標記物，可替代Brdu進行細胞增殖檢測；EdU與DNA的親和力更高，檢測信號更穩(wěn)定。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入EdU溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，固定細胞，加入熒光標記的抗EdU抗體；（4）熒光顯微鏡下觀察細胞熒光強度。

六、LDH實驗（乳酸脫氫酶釋放實驗）

1. 原理：LDH是一種胞內(nèi)酶，當細胞膜受損時，LDH會釋放到細胞外；通過檢測培養(yǎng)上清中的LDH活性，可以評估細胞毒性。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，收集上清；（3）加入LDH底物，酶標儀測定490nm處的吸光度值。

七、中性紅攝取實驗

1. 原理：中性紅是一種細胞活性染料，活細胞可將其攝入細胞內(nèi)；通過測定細胞內(nèi)中性紅的含量，可以評估細胞毒性。

2. 方法：（1）將細胞接種于96孔板，加入不同濃度的待測物質(zhì)；（2）培養(yǎng)一定時間后，加入中性紅溶液；（3）繼續(xù)培養(yǎng)一定時間，棄去上清，溶解細胞內(nèi)的中性紅；（4）酶標儀測定540nm處的吸光度值。

上一篇：氧氮氫分析儀的特點優(yōu)勢與應(yīng)用領(lǐng)域分析

下一篇：預存特惠 || 預存贈高額測試費，最高享19%加贈

相關(guān)文章

一文詳解掃描電子顯微鏡(SEM)的工作原理及應(yīng)用技術(shù)

2023-10-08

熱重分析（TG-DTG）曲線的幾種解析方法

2023-12-26

接觸角測試（CA）的原理、樣品制備要求及實際應(yīng)用

2023-11-16

一文詳細介紹he染色的基本原理、實驗步驟及注意事項

2023-11-23

恒電流間歇滴定法GITT的基本原理以及測試教程

2022-08-12

TMA技術(shù)的基本概念、應(yīng)用領(lǐng)域以及實際操作中的要點

2023-12-06

項目推薦/Project

克隆形成

細胞毒性/增殖

舉報有獎

TEL: 191-3608-6524

如：在網(wǎng)絡(luò)上惡意使用“測試狗”等相關(guān)關(guān)鍵詞誤導用戶點擊、惡意盜用測試狗商標、冒稱官方工作人員等情形，請您向我們舉報，經(jīng)查實后，我們將給予您獎勵。

舉報內(nèi)容：

200

上傳附件：

文件格式不正確，請重新上傳文件格式不正確，請重新上傳文件格式不正確，請重新上傳

文件格式：jpg、jpeg、png、gif、tif、doc、docx、ppt、pptx、xls、xlsx、pdf、zip、rar

聯(lián)系方式

姓名

電話

提交意見

意見反饋

Suggestions

您可以在此留下您寶貴的意見，您的意見或問題反饋將會成為我們不斷改進的動力。

意見類型

測試服務(wù)

網(wǎng)站功能

財務(wù)報賬

其他類型

意見內(nèi)容

200

聯(lián)系方式

姓名

電話

提交意見